Monkeypox Virus MPV Kit di rilevamento dell'acido nucleico Metodo PCR in tempo reale

[Uso previsto]

Questo kit viene utilizzato per il rilevamento del Monkeypox Virus (MPV) in campioni di siero o di essudato della lesione utilizzando
sistemi PCR temporizzati.

[Principio di prova]
Il principio del rilevamento in tempo reale si basa sul test fluorogenico della 5'nucleasi.Durante la reazione di PCR, la DNA polimerasi scinde la sonda all'estremità 5' e separa il colorante reporter dal colorante quencher solo quando la sonda si ibrida al DNA target.Questa scissione si traduce nel segnale fluorescente generato dal colorante reporter scisso, che viene monitorato in tempo reale dal sistema di rilevamento PCR.Il ciclo di PCR in cui viene inizialmente rilevato un aumento del segnale di fluorescenza è proporzionale alla quantità del prodotto di PCR specifico.Il monitoraggio delle intensità di fluorescenza in tempo reale consente di rilevare il prodotto che si accumula senza dover riaprire il tubo di reazione dopo l'amplificazione.Il Monkeypox Virus real time PCR Kit contiene uno specifico sistema pronto all'uso per il rilevamento del Monkeypox Virus attraverso la reazione a catena della polimerasi (PCR) nel sistema PCR in tempo reale.Il master contiene reagenti ed enzimi per l'amplificazione specifica del DNA del Monkeypox Virus.La fluorescenza viene emessa e misurata dall'unità ottica dei sistemi in tempo reale durante la PCR.Il rilevamento del frammento di DNA amplificato del Monkeypox Virus viene eseguito nel canale fluorimetrico FAM con il quencher fluorescente BHQ1.Il tampone di estrazione del DNA è disponibile nel kit e per l'estrazione del DNA vengono utilizzati campioni di siero o di essudato della lesione.Inoltre, il kit contiene un sistema per identificare la possibile inibizione della PCR misurando la fluorescenza Cy5 del controllo interno (IC).Viene fornito un controllo positivo esterno definito come 1×10 7 copie/ml che consente la determinazione della carica genica.

[Componenti del kit diagnostico]

[Strumento applicabile]
Il kit diagnostico è applicabile a MA-6000, serie ABI, serie Bio-Rad, Roche LightCycler R480, Cepheid
SmartCycler, serie Rotor-Gene e altri strumenti PCR quantitativi in ​​tempo reale multicanale.

[Requisiti del campione]
1.Tipi di campioni: campioni di siero o essudati di lesioni

2.I campioni possono essere estratti immediatamente o congelati a una temperatura compresa tra -20°C e -80°C.

3. Il trasporto di campioni clinici deve essere conforme alle normative locali per il trasporto di agenti eziologici.

[Il giudizio del risultato del campione]
1.Se il campione del test rileva una tipica curva di amplificazione di tipo S in FAM≤38 e Cy5 ha una tipica curva di amplificazione, il Ctis≤38.il campione può essere giudicato MPVpositivo.

2.Se il campione del test non ha Ct o Ct > 38 nei canali FAM e c'è una tipica curva di amplificazione di tipo S nel canale del controllo interno (Cy5), il Ctis ≤38.il campione può essere giudicato MPVnegativo.

3.Se il campione di prova non ha una tipica curva di amplificazione di tipo S (nessun valore Ct) o un valore Ct> 38 viene rilevato nel FAM e il canale Cy5 non ha una tipica curva di amplificazione (nessun valore Ct) o un valore Ct> 38, significa che c'è un problema con la qualità del campione o un problema con l'operazione.Se il risultato non è valido, è necessario trovare ed eliminare la causa, prelevare nuovamente il campione e ripetere il test (se il risultato del test è ancora non valido, contattare l'azienda).

[Limiti del metodo di rilevamento]
1. I risultati dei test del diagnos tickit possono essere utilizzati solo per riferimento clinico.La diagnosi clinica e il trattamento dei pazienti devono essere considerati unitamente ai loro sintomi, segni, anamnesi e altre condizioni correlate.

2. Si possono verificare risultati falsi negativi quando la concentrazione dell'acido nucleico rilevato nel campione del test è inferiore al limite minimo di rilevamento di questo kit.

3. Una manipolazione impropria del campione testato durante la raccolta, il trasporto, la conservazione e l'elaborazione può facilmente causare la degradazione del DNA e risultati falsi negativi.

4. Quando i campioni vengono contaminati durante la raccolta, il trasporto, la conservazione e l'elaborazione, è facile ottenere risultati falsi positivi.

[Indice delle prestazioni del prodotto]
1.LOD: il limite di rilevamento è di 200 copie/ml.2. Precisione: Coefficiente di variazione (CV%) del valore Ct di precisione all'interno di batch≤3%.3. Specificità: non esiste alcuna reazione incrociata tra il kit e i campioni positivi, come Smallpox Virus, Cowpox Virus, Vaccinia Virus ecc.

[Precauzioni]
1. L'intero processo di rilevamento deve essere eseguito rigorosamente in conformità con i requisiti di questo manuale nell'area di preparazione del reagente, nell'area di elaborazione del campione e nell'area di amplificazione della PCR, e gli indumenti, gli strumenti e i materiali di consumo sperimentali in ciascuna area devono essere utilizzati in modo indipendente e non possono essere misto.

2. Per ogni esperimento devono essere impostati controlli negativi e positivi.

3.Tutti i reagenti nel kit devono essere completamente scongelati e miscelati a temperatura ambiente e centrifugati immediatamente prima dell'uso.

4. Tutti i controlli negativi e positivi nel kit devono essere trasferiti nell'area di preparazione del campione e conservati separatamente prima del primo utilizzo.

5. Per prevenire l'interferenza della fluorescenza, evitare di toccare la provetta di reazione per PCR direttamente a mani nude ed evitare qualsiasi segno sulla provetta di reazione per PCR.

6. I parametri relativi all'amplificazione dello strumento devono essere impostati in conformità con i requisiti pertinenti di questo manuale e non è possibile miscelare diversi lotti di reagenti.

7.I prodotti di scarto durante l'esperimento devono essere disintossicati prima di essere eliminati.

[Indice dei simboli]

[LABORATORIO DI FABBRICA]

[ESPORTATORE]

Magnus International Limited

F12, New City International Mansion A, 234 Huapao Ave.

Liuyang, provincia di Hunan 410300 Cina

Contatto:Goodwellmedical@gmail.com

[RAPPRESENTANTE AUTORIZZATO]

Lotus NL BV

Koningin Julianaplein 10, 1e Verd, 2595AA, L'Aia, Paesi Bassi.

[PRODOTTO E STANDARD]