Monkeypox Virus (MPV) Kit di rilevamento dell'acido nucleico Kit di test rapido per la casa Kit PCR in tempo reale

[Uso previsto]

Questo kit viene utilizzato per il rilevamento del Monkeypox Virus (MPV) in campioni di siero o di essudato della lesione utilizzando
sistemi PCR temporizzati.

[Componenti del kit diagnostico]

[Test Metodo]

1. Reagente Preparazione(eseguita a “reagente preparazione regione”)

1.1 Estrarre tutti i componenti dal kit diagnostico e collocarli a temperatura ambiente.Consentire ai reagenti di raggiungere l'equilibrio a temperatura ambiente, quindi vortexare ciascuno di essi rispettivamente per un uso successivo.

1.2 In base alla quantità di campioni di prova, controllo positivo MPV, controllo negativo MPV e controllo interno (IC),

pipettare la quantità appropriata di MPV PCR Mix e MPV Enzyme Mix (MPV PCR Mix 15 μl/test +MPV Enzyme Mix 4 μl/test + Controllo interno (IC) 1 μl/test), miscelarli accuratamente per ottenere un PCR-Mastermix, centrifugare istantaneamente per uso successivo.

1.3 Trasferire i reagenti sopra preparati nella "regione di elaborazione del campione" per un uso successivo.

2. in lavorazione e Caricamento in corso di esemplari (eseguita a “campione in lavorazione regione”)

2.1 Questo kit diagnostico non include il kit di estrazione virale di RNA e DNA.Si consiglia di utilizzare il kit di estrazione di RNA e DNA virale prodotto da Changsha Renji Medical Equipment Co., Ltd. per estrarre il DNA virale.L'operazione specifica è conforme alle sue istruzioni.

2.2 Aggiungere 20 μl PCR-Mastermix nella provetta di reazione PCR con 5 μl sopra il campione trattato, il controllo positivo MPV e il controllo negativo MPV e tappare la provetta.Eseguire il rilevamento PCR quantitativo a fluorescenza sullo strumento PCR a fluorescenza.

3.PCR Amplificazione (eseguita a “nucleico acidamplificazione la zona”)

3.1 Posizionare le provette di reazione PCR nei pozzetti dei campioni dell'apparecchiatura di amplificazione.Impostare il controllo positivo MPV, il controllo negativo MPV ei campioni da testare nella sequenza corrispondente e immettere il nome del campione.

3.2 Impostare i parametri del ciclo in base alla seguente tabella per l'amplificazione PCR.

Nota: 1) La raccolta della fluorescenza è impostata su "Step 3: 55 ° C, 30s".Selezione dei canali di rilevamento: FAM e Cy5, dove il canale FAM è il gene target, il canale Cy5 è il gene del controllo interno (IC) e il sistema di reazione è impostato su 25 μl.

2) Gli strumenti PCR fluorescenti della serie ABI non selezionano la calibrazione ROX e selezionano Nessuno per il gruppo di spegnimento.